Mabtech

Zu den Forschungsbereichen, für die wir häufig die Kits von Mabtech empfehlen, gehören Infektionskrankheiten, Krebs, Allergien, Transplantation und Impfstoffüberwachung; außerdem empfehlen wir Mabtech-Antikörper für die kardiovaskuläre und veterinärmedizinische Forschung.

Forscher, die sich für die Immunüberwachung interessieren, wenden sich regelmäßig an uns, um Mabtech-ELISpot-Kits zu beziehen – insbesondere diejenigen, die in den IRIS™-ELISpot-Reader von Mabtech investiert haben. Eine Frage, die uns oft gestellt wird, lautet: „Was sind die wichtigsten Unterschiede zwischen den ELISpot-, FluoroSpot- und ELISA-Kits von Mabtech?“ Zwar basieren alle diese Produkte auf denselben hochwertigen Mabtech-Antikörpern, unterscheiden sich jedoch in ihrer Zusammensetzung.

Mabtech-ELISAs werden in einer Standard-Mikroplatte durchgeführt und liefern in der Regel ein kolorimetrisches Ergebnis, während bei einem Mabtech-ELISpot-Assay die Mikroplattenvertiefungen eine PVDF-Membran enthalten, die mit einem Fängerantikörper beschichtet ist, um zytokinfreisetzende Zellen zu quantifizieren. Der FluoroSpot-Assay baut auf dem ELISpot-Prinzip auf und bietet die Möglichkeit, die Sekretion mehrerer Analyten aus derselben Zelle zu analysieren.

Der ELISA-Assay stützt sich auf Antikörper, die den Zielanalyten binden und nachweisen. Wir bei Mabtech investieren viel Aufwand in die Entwicklung und Charakterisierung der Antikörper. Die Antikörperklone sind häufig dieselben wie beim ELISpot – einer Methode, die eine optimale Sensitivität und Spezifität der beteiligten Antikörper erfordert. Wir validieren die ELISAs stets hinsichtlich der Erkennung nativer Proteine, da sich diese oft von der Bindung der Antikörper an das rekombinante Protein unterscheidet. Die Verwendung hochwertiger Antikörper macht unsere ELISAs sowohl sehr spezifisch als auch empfindlich.

Zellbasierter Immunoassay mit einer Nachweisgrenze von nur einer Zelle pro Million

ELISpot kann in nahezu jedem Umfeld eingesetzt werden, um spezifische Immunantworten zu untersuchen, darunter Impfstoffe, Krebs und Diagnostik.

Untersuchen Sie die Sekretion von Analyten, indem Sie diese unmittelbar und während des gesamten Prozesses einfangen.

ELISpot wird zur Quantifizierung proteinsäuernder Zellen eingesetzt. Bei diesem Assay werden Zellen in einer mit einem Einfangantikörper beschichteten Platte kultiviert. Von den Zellen ausgeschüttete Zytokine, Immunglobuline oder andere Zielproteine werden unmittelbar nach der Ausschüttung und während des gesamten Stimulationsprozesses eingefangen. Nach Entfernung der Zellen werden die ausgeschütteten Proteine mithilfe eines Nachweisantikörpers identifiziert. Nach Zugabe eines präzipitierenden Substrats bilden sich sichtbare Flecken. Jeder Fleck entspricht einer einzelnen, den Analyten sekretierenden Zelle. ELISpot kann Analyten sekretierende Zellen auf Einzelzellniveau quantifizieren und gilt als einer der empfindlichsten verfügbaren zellulären Assays. Darüber hinaus ist ELISpot sehr einfach durchzuführen und eignet sich für die Analyse vieler Proben zu verschiedenen Zeitpunkten. Der Assay lässt sich mithilfe einer 96-Well-Platte automatisieren und mit einem automatisierten ELISpot-Lesegerät schnell auswerten.

• Multiplex-Version von ELISpot

• Kombination von Analyten mit unterschiedlicher Kinetik ohne Beeinflussung intrazellulärer Prozesse

• Robust und leicht von der Entdeckungsphase auf größere Studien skalierbar.

FluoroSpot wird zur Quantifizierung proteinsekretierender Zellen eingesetzt. Dieser Immunoassay verbindet die Empfindlichkeit von ELISpot mit der Möglichkeit, die Sekretion mehrerer Analyten gleichzeitig zu untersuchen. Bei FluoroSpot wird eine Zellsuspension in die Vertiefungen einer Platte gegeben. Von den Zellen sekretierte Proteine werden unmittelbar nach der Sekretion und während des gesamten Stimulationsprozesses durch spezifische Antikörper gebunden. Nach Entfernung der Zellen werden markierte oder biotinylierte Nachweisantikörper hinzugefügt, gefolgt von fluoreszenzmarkierten Sekundärreagenzien. Die gebundenen Proteine bilden fluoreszierende Flecken, wobei jeder Fleck einer einzelnen Zelle entspricht.